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首頁 / 試劑 / 【試用裝】CCK-8細胞增殖檢測試劑盒50T

【試用裝】CCK-8細胞增殖檢測試劑盒50T

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【試用裝】CCK-8細胞增殖檢測試劑盒50T

價格：￥20

品牌：漢恒生物已認證

試用品規格： 50T

試用份額：

30份

試用倒計時：

xx天 xx時 xx分 xx秒后結束

免費試用在線咨詢

試用說明：

1、運費：包郵；包郵； 2、聯系時間：試用活動結束后的7天內； 3、申請要求：每個實驗室只能申請一次； 4、其他說明：無需返還；

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免費申請，無需支付其他費用；
申請時請注意查看郵費信息和試用說明等商家說明，避免不必要的損失；
試用名單在活動結束后 1 個工作內通過短信、郵箱、公眾號等通知；
試用活動結束后，7 天內商家主動聯系發貨；
試用結束后，請及時提交試用報告；
未提交報告，將降低申請成功幾率。

保存條件： -20度凍存

產品簡介
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CCK試劑盒是一種基于WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。WST-8屬于MTT的升級產品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，WST-8可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物（formazan）（圖1-2）?，其顏色的深淺與存活細胞數目成正比。使用酶標儀在450?nm波長處測定OD值，可以間接反應活細胞的數量。
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CCK法應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

圖1. WST-8和WST-8甲攢結構圖

圖2. CCK-8檢測細胞活性原理
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貨號	產品名稱	產品規格	產品包裝	價格
HB-CCK8-1	CCK8細胞增殖試劑盒	100次	1ml	188元
HB-CCK8-2	CCK8細胞增殖試劑盒	500次	5ml	625元
HB-CCK8-3	CCK8細胞增殖試劑盒	1000次	10ml	1125元
HB-CCK8-4	CCK8細胞增殖試劑盒	3000次	30ml	2500元
HB-CCK8-5	CCK8細胞增殖試劑盒	10000次	100ml	6250元

注：4℃干燥避光保存，有效期一年（推薦）。-20℃干燥避光保存，有效期二年。
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產品優勢
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表1 CCK法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優勢比較

檢測方法	MTT法	XTT法	WST-1法	CCK法
甲臜產物的水溶性	差（需加有機溶劑溶解后再檢測）	好	好	好
產品性狀	粉末	2瓶溶液	溶液	1瓶溶液
使用方法	配成溶液后使用	現配現用	即開即用	即開即用
檢測靈敏度	高	很高	很高	高
檢測時間	較長	較短	較短	最短
檢測波長	560-600nm	420-480nm	420-480nm	430-490nm
細胞毒性	高，細胞形態完全消失	很低，細胞形態不變	很低，細胞形態不變	很低，細胞形態不變
試劑穩定性	一般	較差	一般	很好
批量樣品檢測	可以	非常適合	非常適合	非常適合
便捷程度	一般	便捷	便捷	非常便捷

? 注：1、酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾；
? 2、本試劑盒細胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到最佳測定時間。
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毒性測試
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1、在96孔板中配置100?μl的細胞懸液。將培養板放在培養箱預培養24小時（37℃，5% CO₂）。
2、向培養板加入10?μl不同濃度的待測物質。
3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間（例如：6、12、24或48小時）。
4、向每孔加入10?μl CCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數）。
5、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。
6、用酶標儀測定在450?nm處的吸光度。
7、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μl?0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定，吸光度不會發生變化。
注：如果待測物質有氧化性或還原性的話，可在加CCK之前更換新鮮培養基（除去培養基，并用培養基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養基），去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下，可以不更換培養基，直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。
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細胞活性檢測
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1、在96孔板中接種細胞懸液（100?μl/孔）。將培養板放在培養箱中預培養一段時間（37℃,?5% CO₂）。
2、向每孔加入10 μl?CCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數）。
3、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。
4、用酶標儀測定在450?nm處的吸光度。
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5、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μl?0.1?M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定，吸光度不會發生變化。
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注意事項
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1）建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK試劑后的培養時間。
2）有條件的情況下建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。加入CCK試劑時，建議斜貼著培養板壁加，不要插到培養基頁面下加，容易產生氣泡，會干擾OD值讀數。
3）白細胞可能需要培養較長時間。
4）當使用標準96孔板時，貼壁細胞的最小接種量至少為1,000?個/孔?(100 μl?培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500?個/孔?(100 μl?培養基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應的接種量，并按照每孔培養基總體積的10%加入CCK溶液。
5）如果沒有450?nm的濾光片，可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片，但是450?nm濾光片的檢測靈敏度高。
6）培養基中酚紅的吸光度可以在計算時，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會對檢測造成影響。
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活力計算：
細胞活力*（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）] ×100
A（加藥）：具有細胞、CCK溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養基和CCK溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A（0加藥）：具有細胞、CCK溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
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*細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力?
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注：申請后無特殊情況7天工作日內發貨

溫馨提示：不可用于臨床治療。

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上海市浦東新區蔡倫路150號1號樓（www.hanbio.net)
業務范圍：
試劑,技術服務
經營模式：
生產廠商,科研機構
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