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    【試用裝】CCK-8細胞增殖檢測試劑盒50T

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    【試用裝】CCK-8細胞增殖檢測試劑盒50T
    價格: ¥20
    品牌: 漢恒生物 已認證
    試用品規格: 50T
    免費試用 優質試用報告提升試用成功率
    試用份額:
    30

    試用倒計時:
    xx xx xx xx秒后結束
    試用說明:
    1、運費: 包郵 ; 包郵; 2、聯系時間: 試用活動結束后的7天內; 3、申請要求: 每個實驗室只能申請一次; 4、其他說明: 無需返還;
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      • 免費申請,無需支付其他費用;
      • 申請時請注意查看郵費信息和試用說明等商家說明,避免不必要的損失;
      • 試用名單在活動結束后 1 個工作內通過短信、郵箱、公眾號等通知;
      • 試用活動結束后,7 天內商家主動聯系發貨;
      • 試用結束后,請及時提交試用報告;
      • 未提交報告,將降低申請成功幾率。
      • 保存條件: -20度凍存




      產品簡介
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      CCK試劑盒是一種基于WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。WST-8屬于MTT的升級產品,工作原理為:在電子耦合試劑存在的情況下,WST-8可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物(formazan)(圖1-2)?,其顏色的深淺與存活細胞數目成正比。使用酶標儀在450?nm波長處測定OD值,可以間接反應活細胞的數量。
      ?
      CCK法應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

      圖1. WST-8和WST-8甲攢結構圖

      圖2. CCK-8檢測細胞活性原理
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      貨號 產品名稱 產品規格 產品包裝 價格
      HB-CCK8-1 CCK8細胞增殖試劑盒 100次 1ml 188元
      HB-CCK8-2 CCK8細胞增殖試劑盒 500次 5ml 625元
      HB-CCK8-3 CCK8細胞增殖試劑盒 1000次 10ml 1125元
      HB-CCK8-4 CCK8細胞增殖試劑盒 3000次 30ml 2500元
      HB-CCK8-5 CCK8細胞增殖試劑盒 10000次 100ml 6250元
      注:4℃干燥避光保存,有效期一年(推薦)。-20℃干燥避光保存,有效期二年。
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      產品優勢
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      表1 CCK法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優勢比較
      檢測方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK法
      甲臜產物的水溶性 差(需加有機溶劑溶解后再檢測)
      產品性狀 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
      使用方法 配成溶液后使用 現配現用 即開即用 即開即用
      檢測靈敏度 很高 很高
      檢測時間 較長 較短 較短 最短
      檢測波長 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
      細胞毒性 高,細胞形態完全消失 很低,細胞形態不變 很低,細胞形態不變 很低,細胞形態不變
      試劑穩定性 一般 較差 一般 很好
      批量樣品檢測 可以 非常適合 非常適合 非常適合
      便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷
      ? 注:1、酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾;
      ? 2、本試劑盒細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到最佳測定時間。
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      毒性測試
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      1、在96孔板中配置100?μl的細胞懸液。將培養板放在培養箱預培養24小時(37℃,5% CO2)。
      2、向培養板加入10?μl不同濃度的待測物質。
      3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間(例如:6、12、24或48小時)。
      4、向每孔加入10?μl CCK溶液(注意不要再孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。
      5、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。
      6、用酶標儀測定在450?nm處的吸光度。
      7、若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10 μl?0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定,吸光度不會發生變化。
      注:如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK之前更換新鮮培養基(除去培養基,并用培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養基),去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下,可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。
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      細胞活性檢測
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      1、在96孔板中接種細胞懸液(100?μl/孔)。將培養板放在培養箱中預培養一段時間(37℃,?5% CO2)。
      2、向每孔加入10 μl?CCK溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。
      3、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。
      4、用酶標儀測定在450?nm處的吸光度。
      ?
      5、若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10 μl?0.1?M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定,吸光度不會發生變化。
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      注意事項
      ?
      1)建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK試劑后的培養時間。
      2)有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK試劑時,建議斜貼著培養板壁加,不要插到培養基頁面下加,容易產生氣泡,會干擾OD值讀數。
      3)白細胞可能需要培養較長時間。
      4)當使用標準96孔板時,貼壁細胞的最小接種量至少為1,000?個/孔?(100 μl?培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于2,500?個/孔?(100 μl?培養基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養基總體積的10%加入CCK溶液。
      5)如果沒有450?nm的濾光片,可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450?nm濾光片的檢測靈敏度高。
      6)培養基中酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。
      ?
      活力計算:
      細胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)] ×100
      A(加藥):具有細胞、CCK溶液和藥物溶液的孔的吸光度
      A(空白):具有培養基和CCK溶液而沒有細胞的孔的吸光度
      A(0加藥):具有細胞、CCK溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度

      ?
      *細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力?
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      注:申請后無特殊情況7天工作日內發貨
      溫馨提示:不可用于臨床治療。

      風險提示:丁香通僅作為第三方平臺,為商家信息發布提供平臺空間。用戶咨詢產品時請注意保護個人信息及財產安全,合理判斷,謹慎選購商品,商家和用戶對交易行為負責。對于醫療器械類產品,請先查證核實企業經營資質和醫療器械產品注冊證情況。

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